CHIPSeq的原理和应用
来源:互联网 发布:淘宝店铺简介 编辑:程序博客网 时间:2024/06/02 07:03
染色质免疫共沉淀技术(CHIPSeq,也称结合位点分析法,是研究体内蛋白质与相互作用的有力工具,通常用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究。将与第二代测序技术相结合的技术,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的区段。
CHIPSeq的原理是:首先通过染色质免疫共沉淀技术(特异性地富集目的蛋白结合的片段,并对其进行纯化与文库构建;然后对富集得到的片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段信息。
对客户提供的样品(如果有阴阳参启动子区域或序列的)进行定量检测,检测合格后进行测序文库构建、成簇(Cluster generation)扩增、高通量测序。基本数据分析数据产出统计:对测序结果进行图像识别(Base calling),去除污染及接头序列;统计结果包括:测定的序列(长度、数量、数据产量。标准高级数据分析内容包括:CHIPSeq序列与参考序列比对;Peak Caling:统计样品Peak信息(峰检测及计数、平均峰长度、峰长中位数);统计样品Uniquely mapped reads在基因上、基因间区的分布情况及覆盖深度;给出每个样品吴联基因列表及GO功能注释;在多个样品间,对与关联基因做差异分析。
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